watson 177-112C 細(xì)胞計(jì)數(shù)板Neubauer Improved
日本進(jìn)口 Watson 177-112C 一次性細(xì)胞計(jì)數(shù)板血球板
使用方法:
1.準(zhǔn)備適當(dāng)稀釋比例的細(xì)胞懸液。
2.取出干凈的細(xì)胞計(jì)數(shù)板,從計(jì)數(shù)室兩側(cè)的加樣口緩慢加入 6-10uL 細(xì)胞懸液。注意不要有氣泡可同時(shí)計(jì)數(shù) 4個(gè)樣品。
3. 將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡上,找到計(jì)數(shù)視野。靜置 2-3min,待細(xì)胞沉降到計(jì)數(shù)板上,不再隨液體漂移。
4.采用合適的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)并計(jì)算細(xì)胞數(shù)目。
計(jì)數(shù)方法:
1) 針對(duì)常規(guī)培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞
a)選取計(jì)數(shù)室四角 4個(gè)大方格 (每個(gè)大方格由16個(gè)中方格組成),即圖示 W1,W2,W3,
W4,進(jìn)行計(jì)數(shù)。
b)建議調(diào)整細(xì)肥密度為每個(gè)大方格細(xì)胞個(gè)數(shù)為100左右。
c)鏡下偶見(jiàn)有兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算,若細(xì)胞團(tuán) 10%以上,說(shuō)明分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。計(jì)數(shù)一般遵循記上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右原則。
d)細(xì)胞數(shù)目計(jì)算方法:
每個(gè)大方格面積為1mmx1mm,蓋玻片與計(jì)數(shù)室間高度為 0.1mm,即每個(gè)大方格體積為
1mmX1mmx0.1mm=0.1mm3=0.1uL =10mL-4。
2)針對(duì)其他小型細(xì)胞 (血細(xì)胞、西菌、酵母等)。
a )選取計(jì)數(shù)室中央計(jì)數(shù)區(qū) (含 25 個(gè)中方格每個(gè)中方格含 16 個(gè)小方格,共400 個(gè)小方格) 進(jìn)行計(jì)數(shù)。分別計(jì)數(shù) 5個(gè)中方格 (如圖示1,2,3,4,5,或四角和中央一個(gè)中方格。
b )建議計(jì)數(shù)時(shí)每 2個(gè)中方格細(xì)胞個(gè)數(shù)相差不超過(guò)20。
c)鏡下偶見(jiàn)有兩個(gè)以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算,若細(xì)胞團(tuán) 10%以上,說(shuō)明
分散不好,需重新制備細(xì)胞懸液。計(jì)數(shù)一般遵循記上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右原則。
d)細(xì)胞數(shù)目計(jì)算方法:
每個(gè)中方格面積為0.2mmX0.2mm,蓋玻片與計(jì)數(shù)室間高度為 0.1mm,即每個(gè)中方格體積
為0.2mmx0.2mmx0.1mm=0.004mm3=0.004uL=4X10-6mL。

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